2023年12月15日,我院李永红课题组在Biosensors and Bioelectronics期刊(IF=10.7,中科院1区)发表了题为Expression and purification of epitope vaccine against four virulence proteins from Helicobacter pylori and construction of label-freeelectrochemical immunosensor的研究论文,构建的无标记电化学免疫传感器能同时识别H. pylori的四种毒力因子,对H. pylori抗体检测灵敏度高,可用于人血清样本分析,在H. pylori感染相关疾病的早期诊断和预后方面有一定的应用前景。
本研究中,构建了一种基于碳化钛/纳米金胶体复合物修饰碳纳米纤维离子液体糊电极(Ti₃C₂Tₓ/AuNPs@CNFILPE)的无标记电化学免疫传感器,用于幽门螺杆菌(H. pylori)抗体的检测。首先,表达并纯化了幽门螺旋杆菌(H. pylori)四价表位疫苗(FVpE),通过 Western blot 和 ELISA 研究了FVpE的免疫反应活性。接着,构建了基于Ti₃C₂Tₓ/AuNPs@CNFILE的生物相容性平台用于FVpE的固定。采用电化学阻抗法(EIS)和差分脉冲伏安法(DPV)对修饰电极的电化学性质进行了研究,讨论了修饰电极对FVpE的固定能力,评估了抗原与抗体之间的结合力。结合电化学传感技术和免疫分析技术,优化制备和检测参数,建立了幽门螺旋杆菌检测新方法。在最优实验条件下,该免疫传感器对抗H. pylori、CagA、VacA和UreA的线性范围均为0.1 - 5 ng mL -1,UreB的线性范围为0.1 - 4.5 ng mL-1,检测限低至1 pg mL-1。该免疫传感器良好的选择性和稳定性,可用于血清样本的分析。本研究构建的免疫传感器在H. pylori感染相关疾病的早期诊断和预后评估方面具有一定的应用前景,也为构建其他无标记肿瘤标志物免疫传感器提供了新思路。
图2电化学免疫传感器的制备流程和传感示意图
李永红教授,郭乐教授,刘新胜高级实验师为文章通讯作者,杜潮,张震为第一作者,该项研究受到宁夏自然科学基金(No. 2022AAC03147)、国家自然科学基金(No. 32070930, No. 82160497)的资助。
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