双荧光素酶报告基因检测系统是采用萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)和海肾荧光素酶(Rellina Luciferase)组成双荧光素酶报告基因实验系统（Dual-Luciferase Reporter Assay），用以验证microRNA同mRNA、microRNA同LncRNA的靶向互作关系。
（1）双荧光素酶报告基因检测仪器简介：
【品牌/型号】GloMax Navigator微孔板发光检测仪
【简介及应用】GloMax Navigator是一款易用的微孔板发光检测仪，具有非常好的检测性能。仪器具有很高的检测灵敏度和很宽的检测范围，可以在样品中同时检测强发光样品和弱发光样品，可用于生物发光报告基因、细胞和生化分析等多种发光检测。发光检测仪可选配双自动进样系统，进行96孔板闪光和辉光型的发光样品检测。
（2）实验方案及收费标准
1 |
双荧光素酶报告基因检测（验证microRNA同mRNA、microRNA同LncRNA的靶向互作关系） |
野生型及突变型荧光素酶质粒的设计及构建 |
检索调取目的基因序列、设计突变基因序列、构建野生型及突变型荧光素酶报告基因质粒（4500元） |
上机检测（50元/板，不足一板按一板计算） |
根据结果进行数据分析并出具实验报告 |
1. 价格以转染293T细胞为标准，如转染其他细胞株或需要进行复杂的分组测试分析，需做具体实验评估后报价。 2. 客户提供： （1）microRNA mimics及inhibitor模拟物； （2）非编码RAN基因序列及相关信息及目的调控基因序列及相关信息。 |
2 |
将构建好的质粒转染目的细胞并培养 |
将构建好的野生型及突变型的双荧光素酶报告基因质粒转染到目的细胞并培养（5500元） |
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3 |
按客户要求提供构建好的载体 |
以具体实验协议为准 |
案例: microRNA同mRNA 靶向互作关系验证
实验说明：
图A. miR-126a-5p与靶基因DLK1位点结合位点
图B. miR-126a-5p与结合位点碱基未突变和突变的DLK1位点结合示意
图C. miR-126a-5p与结合位点碱基未突变和突变的DLK1共转染后相对荧光活性 ****P<0.0001
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