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Nanodrop分光光度计操作规程

发布日期:2023-11-28    作者:     来源:     点击:
  1. 1.双击电脑屏幕上的Nanodrop图标,启动软件.

  2. 2.选择所需的测量模式,屏幕上会弹出初始化仪器的提示.往仪器的加样孔中加入1.5微升的蒸馏水,合上上盖使形成液柱,然后点击确定以开始初始化,可以听见电磁阀开合的声音.

  3. 3.五六秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用擦镜纸将蒸馏水擦干净,加入1-2微升的Buffer,合上上盖并点击Blank.

  4. 4.Blank完成后,用擦镜纸将Buffer擦干净即可以开始上样,点击Measure开始测量.

    建议: 在每次测量完毕后,用蒸馏水清洁样品平台,这样可以保证下一次测量的准确性。

    每次测量的样品量建议不少于2微升

    图一 图二

    图三 图四

  5. 5.测量完成后,点击Show Report查看结果,选择Save进行保存.

  6. 6.保存的数据对应地保存在C:\Nanodrop Data文件夹.

    :  具体的实验方法如BCA,Bradford等以及标准曲线的建立请参阅生物学资料和说明书

    名词:

    Nuclear Acid Measurement:  核酸测量

    Protein 280:  280nm波长测量蛋白,选择适当的蛋白类型(BSA,IgG),软件将在测量后给出吸光度值并自动计算其浓度

    MicroArray Measurement:  使用不同的荧光染料来测定核酸浓度

    UV-vis Measurement:  连续波谱扫描,可用于寻找最大吸收峰

    Cell Cultures:  600nm波长测量菌密度

    Protein BCA:  BCA法测蛋白

    Protein Bradford:  Bradford法测蛋白

    Protein Lowry:  Lowry法测蛋白

    User Preference:  用户对于软件的默认设置做一些修改

    Utility & Diagnostics:  性能诊断

    Sample Type:  选择样品的类型

    l: 使用者自己输入波长,并查看样品在此波长的OD

    Abs:  吸光度值

    A260 10mm Path: 常规的分光光度计使用的比色杯宽度约为10mm,即测量光程为10mm,与常规分光光度计不同的是,Nanodrop的测量光程是1mm0.2mm.但是软件会自动将所测得的吸光度值转换成10mm光程对应的值. A260 10mm Path就是指10mm测量光程时样品在260nm波长时的OD

    A280 10mm Path: 10mm测量光程时,样品在280nm波长时的OD

    Dye: 染料

    Max Absorbance: 使用者自己输入纵轴的最大量程

    Hi Abs: 点击此钮用于测量高浓度样品(最高至10mm测量光程的75A ),仪器将采用0.2mm光程测量

    Replicate#: 测量重复样品或重复的标准品时的计数器

    Reset This Std: 清除所选标准品的所有重复样品